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利用離心機處理與測定血漿樣品

發布時間:2014-4-2 10:59:19??????點擊:

取血漿200μl , 加10 %高氯酸溶液100μl ,漩渦混勻,10 000 r·min - 1離心5 min ,取上清液100μl ,加入NaOH 溶液50μl , 漩渦混勻30 s 后, 加入衍生化試液OPA100μl ,漩渦混勻,置暗處放置10 min ,吸取20μl 進樣, 按上述條件測定,記錄色譜圖和GSH 衍生物峰面積A。

處理方法
1,200,100μl一般用移液槍比較方便,國產的還是進口的你可以根據實驗要求和經費情況自己選擇

2,我們做血漿樣本時10 %高氯酸溶液蛋白沉淀,然后要調pH值的,當然你可以試驗一下加入NaOH的量,以后不用每管都調pH的,加固定量就好

3,離心時轉速我們一般就用16000rpm的,效果不錯啊,轉速的影響沒有考察過,但是離心機轉速較高時比較容易發熱,如果你的藥熱不穩定的話要注意;

4,NaOH 溶液濃度和用量第2點已經說了

5,加入衍生化溶液后,要暗處放置應該是因為這個衍生化試劑或衍生化反應發生的條件需要避光,這個試劑應該比較成熟了

另外,空白血漿應該不是指不加衍生化試劑,而是除了不加藥物,其他試劑和處理方法都和含藥血漿一樣,加衍生化試劑可以知道衍生化試劑對樣品峰有沒有干擾。

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