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它是原生質體制備提取實驗老搭檔

發布時間:2021-11-24 18:34:13??????點擊:

  原生質體制備提取實驗不能缺少老搭檔——離心機,它可以說是原生質體制備提取實驗必備儀器了。

  原生質體制備提取作用有五點:

  1.細胞融合。

  2.原生質體中進行瞬時表達:亞細胞定位,蛋白和核酸相互作用。

  3.利用膜片鉗技術研究離子通道及原生質體在受光、脅迫和激素作用后的調節機制的研究。

  4.細胞壁再生、細胞分裂與分化、攝入細胞器、病毒侵染機理、膜透性及離子轉運等基礎理論研究的理想材料。

  5.被用來作為研究植物細胞鈣信號轉導及其調節機制的理想材料。

  由此可見原生質體純化的重要性。下面以植物為例,進行簡單講解:

  纖維素酶和果膠酶能分解植物細胞壁,形成原生質體;加入0.6mol/l甘露醇的目的是維持原生質體正常的形態,防止原生質體吸水脹破;不同植物細胞結構不同,則原生質體結構不同;原生質體的結構由細胞膜、細胞質和細胞核組成。

  將酶解后的組織液過尼龍網膜,去除未充分消化的組織碎片,選擇與原生質體等滲的buffer清洗原生質體兩次,離心去除碎片(一般采取50-100 g,離心機離心1-2 min左右),最后將原生質體重懸于適當濃度甘露醇中??蓞⒖家韵路椒▉斫档驮|體懸液中的碎片占比:

  1. 提前優化樣本,比如剝去外皮(僅限于研究對象不包含外皮部分的樣本)、棄去質地堅硬的組織和損傷組織。

  2. 降低離心機離心轉速和時間,去除留在上清中的碎片。

  3. 如果原生質體起始量足夠大,可考慮通過流式分選去除碎片。

  以上就是關于離心機在原生質體制備提取實驗中的應用,如果您還想了解更多有關離心機的信息,可以多多關注上海盧湘儀離心機儀器有限公司。


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